排草香细胞毒性及木犀草素含量的测定

目的测定排草香不同溶剂提取物对人胃癌细胞MGC-803细胞毒性的影响及其中木犀草素的含量。方法分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)及磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法测定排草香不同溶剂(水、乙醇、乙醚)提取物对人胃癌细胞MGC-803的细胞毒性,以紫杉醇组作为阳性对照;建立高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)法测定不同提取物中木犀草素的含量。结果 MTT、SRB法测定显示,排草香各提取物组及紫杉醇组均对MGC-803细胞显示出一定的毒性;IC50对比各组细胞毒性:紫杉醇组>醚提物组>醇提物组>水提物组,且排草香醚提物组及醇提物组的细胞毒性均显著高于水提物组(P<0.05);木犀草素在0.03~0.77 mg/m L范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=7),仪器精密度良好(RSD=0.17%,n=6),重复性良好(RSD=0.32%,n=6),加样回收率良好(101.13%,RSD=1.43%,n=6),稳定性良好(RSD=0.16%,n=6);各提取物中木犀草素含量对比:醚提物(0.98%)>醇提物(0.65%)>水提物(0.43%)。结论排草香具有一定的抗癌活性,且其活性可能与木犀草素含量有关,为临床排草香抗癌的应用提供理论依据。     

口腔实习生操作技能培养存在的困难及对策

通过总结口腔医学生临床实习中操作技能培养存在的困难,并对其进行分析,针对现存的问题提出解决方法,旨在提高口腔临床实习的操作技能,为培养实用性口腔医学人才提供指导。     

烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位

目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位.方法 取新生SD大鼠的海马组织,进行胶质细胞的混合培养,然后分离纯化小胶质细胞,采用免疫荧光染色检测CD11b/c进行小胶质细胞的鉴定;采用RT-PCR和免疫荧光双标分别检测α7-nAChR在小胶质细胞中的表达和定位.结果 免疫荧光染色显示分离纯化的细胞表达小胶质细胞特异性抗体CD11b/c;RT-PCR能扩增出长度为450 bp的α7-nAChR目的 条带,免疫荧光双标检测显示小胶质细胞CD11b/c和α7-nAChR染色阳性,分别呈红色和绿色荧光,叠加后呈棕黄色,且细胞膜荧光信号较强.结论 α7-nAChR在体外培养的海马小胶质细胞中能正常表达,定位在细胞膜的功能性α7-nAChR较丰富.     

原发性肝癌的白蛋白靶向超声造影剂的二步法制备

目的 运用生物素-亲和素系统制备表面带有肝癌细胞膜蛋白的单克隆抗体的白蛋白微泡,并探讨其体外特异性与稳定性作用.方法 将亲和素作为微泡的原材料之一,与白蛋白按一定比例混合,声振出外壳含亲和素蛋白的超声微泡显影剂.再与已生物素化的Hab18G单克隆抗体进行偶联,并采用玻片凝集法检验抗体的活性是否正常.以高表达Hab18G蛋白的人肝癌细胞和几乎不表达Hab18G蛋白的肝星状细胞分别为对象进行花环形成实验,检验靶向微泡的特异性结合作用.结果 以此法制备的靶向微泡的玻片凝集反应呈阳性;花环实验中,可见靶向微泡沿着人肝癌细胞的轮廓呈线性排列,形成花环,而肝星状细胞表面未见明显免疫微气泡附着.结论 通过二步法,运用生物素-亲和素系统能够将抗体有效地偶联到白蛋白微气泡表面,制备出特异且稳定的靶向超声造影剂.     

改良气胸针在人工气胸成形术中的有效性和安全性探讨

随着电子内窥镜及电视摄像技术的进步,内科胸腔镜技术不断发展,目前已被广泛应用于临床[1].国内外已有报道使用内科胸腔镜诊治不明原因的胸腔积液,但对于无胸腔积液的胸膜疾病的报道较少,主要原因是人工气胸的建立仍存在一定困难,受到仪器设备、操作技巧及费用等限制.我们采用改良气胸针对2009年11月至2010年11月南方医科大学南方医院呼吸科经胸部CT检查发现胸膜异常增厚或少量胸腔积液的21例患者建立人工气胸,通过内科胸腔镜及胸膜活检,获得病理学确诊.观察人工气胸形成术成功率及患者在术中的生命体征变化,旨在评估其有效性、安全性和可行性,初步探讨其应用价值.     

Aβ1-42作用的小胶质细胞对体外培养的神经干细胞生存的影响

目的: 探讨β-淀粉样蛋白(Aβ_1-42)作用的小胶质细胞对体外培养的神经干细胞(NSCs)生存的影响。方法: 利用Transwell小室在体外建立NSCs与小胶质细胞共培养体系,检测Aβ_1-42蛋白作用小胶质细胞前后NSCs增殖、分化及凋亡情况。结果: 与单纯共培养组相比,Aβ_1-42干预共培养组的增殖率降低,且微管相关蛋白2(MAP-2)和胆碱乙酰转化酶(CHAT)阳性表达率也均降低。结论: Aβ_1-42介导的炎症反应抑制了神经干细胞的增殖,促进其凋亡,并能显著降低其分化成神经元尤其是胆碱能神经元的能力。     

血管内皮生长因子受体2单抗的靶向超声造影剂制备及体外评价

目的探讨携血管内皮生长因子受体2(KDR)单抗的靶向脂质微泡的制备方法,并对其物理特性、生物活性、靶向黏附稳定性进行体外测定。方法采用声振仪制备生物素化脂质微泡(MB-B),再应用生物素-亲和素桥连技术构建携KDR单抗的靶向微泡(MB-BAB-KDR)。荧光显微镜下观察MB-B、单纯单抗微泡(MB-B-KDR)、MB-BAB-KDR与荧光二抗孵育后荧光强度。利用平行板流动腔技术体外模拟生理血流剪切力条件,评价靶向微泡的黏附效能。结果制备的靶向微泡MB-BAB-KDR呈圆球形,粒度分布均匀。与荧光二抗孵育后,MB-BAB-KDR发出明亮的绿色荧光(Ⅱ级),而MB-B-KDR显示微弱的绿色荧光(Ⅰ级)、MB-B无荧光(0级)。体外黏附实验显示,MB-BAB-KDR结合数目随着小鼠KDR Fc包被浓度的增高而增加(P<0.05),相同浓度下,随着时间的增加,MB-BAB-KDR结合数目增加。结论成功构建生物素-亲和素桥连的靶向脂质体微泡MB-BABKDR,体外黏附实验显示MB-BAB-KDR具有黏附稳定性,且与时间、浓度呈正相关。     

白藜芦醇对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究白藜芦醇(Res)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤及凋亡的保护作用及机制.方法体外培养第4～6代HUVECs,分为空白对照组、H2O2损伤组(300μmoL)、Res低浓度(5 μmoL/L)、中浓度(10 μmoL/L)、高浓度(20 μmoL/L)预处理1 h加H2O2损伤组.用噻唑蓝比色法检测HUVECs活力,试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性,流式细胞仪分析细胞凋亡率,western blot检测caspase-3的表达.结果 与空白对照组比较,H2O2损伤模型组细胞活力显著降低、MDA和LDH量显著增加、SOD和GSH活性显著下降、细胞凋亡率和caspase-3表达显著增加(P＜0.01).结论 Res通过降低与凋亡过程直接相关的caspase-3表达,抑制H2O2诱导内皮细胞凋亡,减轻H2O2对内皮细胞的损伤作用,从而产生保护血管内皮细胞的作用.     

基因检测在急性冠脉综合征患者PCI术后个体化抗血小板治疗中的应用

目的:探讨基因检测在急性冠脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后氯吡格雷个体化抗血小板治疗中的应用价值。方法:临床药师参与3例ACS患者PCI术后抗血小板治疗,综合分析其病变复杂程度、支架长度及数量、并发症、吸烟史等发生支架内血栓的危险因素,建议行氯吡格雷相关基因[细胞色素P450(CYP)2C19、对氧磷酶1(PON1)、三磷酸腺苷结合盒亚家族B成员1(ACBC1)等]检测,并根据检测结果分别提出更换其他类别的抗血小板药、维持原治疗方案并增加监测强度等建议。结果:医师采纳临床药师建议。综合基因检测结果及患者临床因素优化抗血小板治疗方案后,3例患者病情稳定,均带药出院。结论:基因检测可为ACS患者PCI术后个体化抗血小板治疗方案的制订提供依据,可作为临床药师开展药学服务的切入点之一。临床药师在进行基因检测时,应对ACS患者进行血栓风险评估,选择适宜的检测人群;同时应在基因检测的基础上,综合评估患者的用药依从性、支架内血栓风险、药物疗效及不良反应等临床因素和循证药学证据,优化抗血小板治疗方案,以保证用药的安全、有效。     

半枝莲的HPLC指纹图谱研究

目的:建立半枝莲单味药材的HPLC鉴定方法。方法:MerkLiChrospherRp18e柱,采用甲醇和乙酸水溶液(pH2.4)梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长270nm。结果:建立了半枝莲药材的HPLC指纹图谱。结论:HPLC指纹图谱鉴定法可用于半枝莲的鉴定。